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第398章 463我偶像就是牛逼（第3页）

还挺能摆谱的啊！胡嘉然心想，不过这话他就是在心里说说，心里明白肯定是患者的身份地位不一般。

见到高风后，他很自然的接过了后者递过来的小册子，仔细看过后眉头皱了起来。

前期t细胞的提取很简单，他们肯定能完美的做到，但制造car-t细胞这一步难度很大，他们还没做过类似的操作呢。

总的来说就是话题太高端了，他们估计抓瞎啊。

“你不要被他的名字给迷惑了。”高风笑道，“基因改造听着高大上，其实也就是那么回事。”

只要明白原理，我深信以胡嘉然的动手水平完全可以做到。

“原理估计都够我一阵子琢磨的。”胡嘉然没有那么乐观，他完全没有这块知识，从头学起太费事了。

“这样吧，我给你说怎么做，你动手就可以了。”高风想了一下说道，他让胡嘉然来主要就是看中了后者的动手能力。

得益于患者家属强大的协调能力，一切都进展的很顺利。

首先是分离t细胞，在外周血中，使用离心等方法分离出t细胞，并进行进一步的清洗以去除红细胞和其他杂质。

这一步底层科研民工都能做到，对团队自然毫无压力。

基因改造这一步要先选择合适的逆转录病毒或其他病毒载体，高风选的是γ-逆转录病毒，别问为什么，问了就是突发奇想。

“那用什么方法将编码car蛋白序列的外源基因转入t细胞中呢？”巩博士问道，这一步明显是最大的难点，他和几人琢磨了很久，现在还没有头绪。

“是不是可以用电离传导方法呢？”赵康出声道，“之前我参与过一个项目，他们就是采用的这个方法，就是成功率不怎么高。”

事实上成功率不是不高，而是特别低，那个项目最终流产了，出资方赔的哇哇叫。

“用电穿孔法吧。”胡嘉然说道，“我们把电压设置到”

“成功了！”巩博士大喊一声道，他有一点激动，剩下的全是不知所措。

说好的难点呢？就这？

“让我看一下！”胡嘉然立马把他挤到了一边。

“快！赶紧验证一下现在的t细胞能不能表达car！”

验证的结果让人非常满意，这意味着研发流程往前进了一大步。

接着就是激活和扩增步骤，在添加适当的共刺激分子如cd3cd28后，使用免疫磁珠系统刺激t细胞，并通过表达共刺激配体的细胞来诱导t细胞的大量增殖。

“可我们不会这个免疫磁珠系统啊。”胡嘉然跑着去找高风。

免疫磁珠的原理是运用核-壳的合成方法合成含有超顺磁性物质的高分子表面覆盖的复合材料、稳定性好、能进行后期标记的物质。

利用这些物质表面的功能集团如氨基、羧基、巯基等进行抗体的共价或者非共价偶联，可用于结合相应的抗原或抗体，这样在外加磁场的吸引下可做定向移动，从而达到分离，检测，纯化基因、蛋白质、细胞、微生物等的目的。

听着很简单，但做起来很难的，国内就没几个这方面的人才。

“没那么难，我给你讲步骤，你来动手。”高风对胡嘉然说道，后者一脸的无语。

“风哥，我可只是本科学历啊。”他善意的提醒道。

“这个就是熟能生巧。”高风解释道，“就是博士，前期做的时候也得一步一步熟悉。”

他在空间里面肝了好久了，只成功过一次，但就是对胡嘉然有一种莫名的信心。

这孩子手巧！

“首先呢，我们要进入细胞悬液制备，组织——裂红——细胞计数——nave细胞——重悬”

胡嘉然皱起了眉头。

“其次我们要进入磁珠孵育流程，磁珠组分——移液——吹打——磁极使用——收集”

胡嘉然脸色变得苍白。

“然后就是流式分析流程，克隆号选择——去死活——圈门逻辑”

胡嘉然脑门上全是汗，只觉得一阵恶心。

“坏了，我对这些高大上的知识过敏！”他心想道。

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